التحول إلى مجتمع الفصام: خلق ثقافة معقمة من الفطر الموجود: 3 خطوات (بالصور)

2024 مؤلف: John Day | [email protected]. آخر تعديل: 2024-01-30 07:41

تركز هذه التعليمات على شرح كيفية إنشاء ثقافة معقمة لفطر Schizophyllum Commune (الاسم الشائع لفطر Split Gill) على طبق بتري باستخدام الفطر الموجود. تم العثور على Schizophyllum Commune بها أكثر من 28000 جنس ، ويمكن العثور عليها في جميع القارات باستثناء القارة القطبية الجنوبية ، ولديها القدرة (مثل "فطريات العفن الأبيض والبني الأخرى") على تحطيم التلوث المعطل الغدد الصماء (البلاستيك ، الهرمون الذي يحاكي البتروكيماويات الصناعية مثل السماد Atrazine ، الملدنات Bisphenol-A ، أو الهرمون الاصطناعي Diethylstilbestrol).

سوف أتطرق إلى تقنيات تحديد الفطر البري ، وكيفية صنع طبق بتري بتري المغذي ، وكيفية استخدام الفطر الذي وجدته لتنمية ثقافة معزولة معقمة في طبق بتري الخاص بك. تتطرق التعليمات الأخرى في هذه السلسلة إلى تقنيات مثل التحديد الجيني للفطر ، والمقايسات الأنزيمية البسيطة لاختبار قدرة الفطر على تحطيم البلاستيك والهرمونات التي تحاكي التلوث ، وكيفية صنع الجبن باستخدام S. Commune.

جاء هذا المشروع من العمل التعاوني لماري ماجيك وباولا بين وأنا أثناء الإقامة في HANGAR في برشلونة إسبانيا في خريف سبتمبر 2018. لمزيد من المعلومات حول المشروع ، اقرأ على ~~ أو تخطي كل Bla Bla وانتقل مباشرة إلى Step 1 للبرنامج التعليمي:)

الصور مأخوذة من Schizophyllum Commune Fanzine ~ يمكن تنزيل ملفات مجانًا هنا

خلال فترة الإقامة كانت أهدافنا الرئيسية الثلاثة هي:

1 ~ بحث واستيعاب المؤلفات العلمية حول Schizophyllum Commune وتفاعلاتها المختلفة مع الهرمونات والغدد الصماء التي تعطل الملوثات البتروكيماوية. S. Commune هو واحد من العديد من الفطريات "العفن الأبيض والبني" مع القدرة على تكسير التلوث الهرموني والغدد الصماء. تتغذى هذه الفطريات على الأشجار عن طريق إفراز إنزيمات "lignocellulosic" من أجسامها المتصلة بالشبكة أو "mycelia" وتكون الإنزيمات قادرة على تكسير السليلوز واللجنين اللذين تصنعهما الأشجار. بسبب التشابه الهيكلي بين السليلوز واللجنين و EDS / الهرمونات مثل Atrazine و BPA و Estradiol و Diethylstilbestrol و Nonylphenols ، فإن إنزيمات "lignocellulosic" التي تفرزها الفطريات يمكنها أيضًا تكسير مجموعة متنوعة من المواد السامة. بالإضافة إلى ذلك ، ينتج S. Commune عديد السكاريد المنبه للمناعة التي تساعد في الوقاية والعلاج من السرطان (معتمد في اليابان لعلاج سرطانات عنق الرحم) ، ويمكن أن يعزز خصائص الاستروجين النباتي لنباتات معينة من خلال التخمير ، ويمكن استخدامه بدلاً من المنفحة و lactobacilius في عمليات صناعة الجبن ، وإنتاج إنزيمات مذيبة للجلطة الثرومبين (مفيدة في علاج تجلط الدم). من الغريب أن هذه "بيتا جلوكان" نفسها التي يمكن استخلاصها بالماء المغلي مثل علاجات السرطان والمنشطات المناعية ، تستخدم أيضًا في صناعة البترول لتعزيز إنتاجية الزيت ، وربط S. البتروكيماويات قادرة على التدهور والمعالجة.

2 ~ تطوير بروتوكولات DIY و DIWO (افعل ذلك مع الآخرين) التي تبسط هذه المستلمات للعمل مع EDC والفطريات لترجمة المعرفة العلمية المقننة إلى لغة يسهل الوصول إليها. استخدم هذه المتلقين للتعليم ، وللتساؤل ، ولمقاومة الاستعمار الجزيئي ، وخلق روايات جديدة حول ظهور أنواع متعددة وطفراتنا الجماعية.

3 ~ تحدى الخطاب السائد المكوّن من تكوّن الغدد الصماء حول المواد الكيميائية المسببة لاضطرابات الغدد الصماء (EDC's). نقلاً عن منحة Malin Ah-King و Eva Hayward حول هذه القضايا ، "تنقل العديد من وسائل الإعلام هذه الحكايات المخيفة عن الغدد الصماء من ساحاتنا الخلفية. التي تهدد الجنس والنشاط الجنسي. بدلاً من معالجة العديد من المخاطر الصحية الأخرى المرتبطة بالتعرض للسموم ، فإن أكثر القضايا إثارة للجدل هي موضع نقاش واستجابة نقدية. إنها تثير أسئلة: لماذا يعتبر الجنس أكثر أهمية من السرطان ، وأمراض المناعة الذاتية ، وحتى الموت؟ ما هي الأعصاب الثقافية (كثير منها معولم) ، التي يتم تحفيزها؟ وبالنسبة لأولئك منا الذين لديهم اهتمامات نسوية ، كيف يمكننا إعادة توجيه النقاش بعيدًا عن الجوهرية والتمييز الجنسي والمغايرة؟ " (الأجناس السامة).

إن Schizophyllum Commune هي "فطريات العفن الأبيض" الفريدة من نوعها حيث وجد أنها تحتوي على أكثر من 28000 جنس وراثي. هذا التكيف ، حسب العديد من النظريات ، مكّن التنوع الجيني المذهل لهذا النوع الموجود في كل قارة حول العالم باستثناء القارة القطبية الجنوبية. أردنا الاحتفال بالتعدد الجنسي الجميل لهذا الكائن الحي كمثال على غرابة علم الأحياء. يركز الخطاب السائد المحيط بـ EDC في وسائل الإعلام ، وحتى من النشطاء البيئيين بشكل كبير على الروايات غير العلمية ، بأن هذه الجزيئات تسبب بعض النشاطات الجنسية أو الأجناس التي يمرضها مجتمعنا ، ويصفها بأنها غير معيارية ، وغالبًا ما تسعى إلى القضاء عليها أو تجنبها. لا يقتصر الأمر على التركيز على الذعر الجنسي والخوف من الغضب العام حول EDC غير الواقعي علميًا (الهرمونات واضطرابات الغدد الصماء لا تجعل الناس شاذين أو متحولين) ولكنه يتجاهل جميع التأثيرات الحقيقية المدمرة التي يمكننا ربطها بـ EDC: السمنة ، اضطرابات الغدة الدرقية ، وأنواع معينة من السرطان ، من بين مخاطر صحية أخرى.

الخطوة 1: ابحث عن مجتمع Schizophyllum الذي يعيش في مجتمعك

يمكن شراء مزارع معقمة من فئة المختبر من Schizophyllum Commune بحوالي 350 دولارًا من بنك الثقافة الميكروبيولوجية مثل ATCC … ولهذا السبب اخترنا الاستزراع من الفطر البري مجانًا:)

كان الأمر سهلاً لأنني كنت أقرأ عن Schizophyllum Commune وصدف أن لاحظت أنها تنمو على شجرة أمام شقتي ذات يوم. إذا لم تكن محظوظًا جدًا لأنك تعثرت بطريق الخطأ على S. Commune في منطقتك ، فستحتاج إلى الذهاب إلى منطقة مشجرة للبحث عن فطر "قوس" ينمو على أشجار الخشب الصلب (الأشجار التي تبدو وكأنها لا تفعل ذلك) جيد جدًا) أو الأشجار المتساقطة. S. Commune هي واحدة من أكثر الفطريات الموجودة شيوعًا حول العالم ويمكن العثور عليها أساسًا في أي مكان يوجد فيه خشب صلب ينمو عليه.

يوفر Mushroomobserver.org وصفًا تفصيليًا رائعًا للمكان والوقت الذي من المحتمل أن تجد فيه S.

"تحديد الهوية: يمكن التعرف بسهولة على مجتمع الفصام من خلال الخياشيم المنقسمة والشعر الكثيف والغطاء على شكل مروحة. يبلغ عرض الغطاء 1-4.5 سم وعادة ما يكون شكل قشرة أو مروحة بسطح رمادي إلى أبيض. وتتراوح الأبواغ القاعدية 5-7.5 × 2 -3 ميكرومتر: فطر مشابه يعرف باسم "الخياشيم المعقمة" Plicaturopsis crispa لا يتم توزيعه على نطاق واسع.

الموئل: ينمو مجتمع الفصام على الخشب الصلب باستخدام الإنزيمات لتحلل اللجنين ويسبب "العفن الأبيض". لذلك توجد في معظم المناطق الخشبية. يمكن العثور عليها على مدار السنة بسبب قدرتها على الجفاف ، والترطيب في ظروف أفضل ، ثم الاستمرار في التبويض.

يمكن أن تكون هذه الفطريات طفيلية على الأشجار ذات القطر الصغير التي تتعرض للإجهاد من عوامل أخرى ، مثل الجفاف.

نظرة متشابهة: Plicaturopsis crispa أو "Crimped Gill" تشبه الخيشوم المنقسمة. كما أن لديها جسم ثمرى على شكل صدفة / مروحة. لكن القبعة لونها بني محمر أو بني أصفر ، والجانب السفلي مميز للغاية. يحتوي على وريد مجعد مثل الخياشيم التي تختلف كثيرًا عن الخياشيم المنقسمة في بلدية Schizophyllum. إن Crimped Gill أقل شيوعًا ولكنها مميزة عند العثور عليها ".

الخطوة 2: اصنع أطباق أجار المغذيات لـ S. Commune لينمو عليها

لعزل ثقافة من S. Commune ، ستجد أنك ستحتاج إلى بعض أطباق بتري المليئة بطعام الفطر. مستخلص الشعير Agar هو وسيلة بسيطة لصنع الطعام لـ S. Commune ، أو "الوسائط الغذائية" التي يمكن صنعها بمكونات يسهل الوصول إليها. إنه أيضًا مصدر غذاء جيد لاستخدامه عند إجراء تجارب المقايسة الإنزيمية مع S. Commune وفطريات العفن الأبيض أو البني الأخرى ~~ ستتم تغطية هذه العملية في تعليمات أخرى.

ملاحظة جانبية: إذا كنت تواجه مشكلة في العثور على S. Commune ، فهناك العديد من الفطريات الأخرى في نفس العائلة التي يمكن زراعتها باستخدام نفس العمليات وهي جيدة إن لم تكن أفضل في تحطيم الملوثات المسببة لاضطرابات الغدد الصماء. تم العثور على ذيل الديك الرومي (Trametes Versicolor) في العديد من الدراسات التي نظرت في مئات من فطريات العفن الأبيض والبني لتكون من أكبر منتجي الإنزيمات "lignocellulosic" التي تعمل على تحطيم التلوث البتروكيماوي. فطر المحار أيضًا جيد جدًا في هذا.

أقوم بعملي الميكروبيولوجي في مختبر بيولوجي مجتمعي يسمى BUGSS (مساحة بالتيمور تحت الأرض للعلوم) حيث يمكنني الوصول إلى الأواني الزجاجية ، والمقاييس الرقمية ، والأسطوانات المتدرجة ، والأوتوكلاف (لتعقيم الوسائط بالحرارة والضغط) ، وما إلى ذلك. ظهرت في جميع أنحاء العالم في العقد الماضي ، لذلك قد ترغب في التحقق من هذه القائمة لمعرفة ما إذا كان هناك واحد بالقرب منك. إذا لم يكن لديك مختبر مجتمعي رائع مثل هذا في منطقتك ، فسيتعين عليك الاستثمار في بعض المعدات الأساسية لهذه العملية مثل:

1 ~ مقياس رقمي لقياس مكوناتك بدقة

2 ~ قدر ضغط لتعقيم الوسائط بالحرارة والبخار

3 ~ أطباق بتري ، يمكن شراؤها عبر الإنترنت بثمن بخس ، وسيعمل الزجاج القابل لإعادة الاستخدام أو البلاستيك القابل للتصرف ولكن إعادة الاستخدام دائمًا أفضل:)

4 ~ بعض الأواني الزجاجية لخلط المكونات وتعقيمها وتخزينها.

إذا كنت لا ترغب في الاستثمار في هذه المعدات ، فيمكنك العثور على لوحات أجار مستخلص الشعير مسبقة الصب لشرائها على مواقع الويب مثل أمازون ~ سيكون الأمر أكثر تكلفة على المدى الطويل إذا كنت تخطط لمواصلة القيام بأعمال ميكروبيولوجية.

يوجد بالفعل العديد من الأدلة الرائعة ومقاطع فيديو youtube حول كيفية صنع أطباق بتري الخاصة بك من وسائط المغذيات في المنزل. لذا بدلاً من الخوض في تفاصيل كبيرة حول هذا الأمر ، سأقوم فقط بالربط بزوجين - وأقدم الوصفة لـ 2٪ Malt Extract Agar ، وهي الوسائط الغذائية التي ستستخدمها.

Freshcap Musrooms: دليل حول كيفية صنع أطباق أجار لزراعة الفطر في المنزل

Mykoweb: البدء في زراعة الفطر

ورقة البيانات الفنية Malt Extract Agar

2٪ خلاصة الشعير أجار (MEA) ~~ وصفة لـ 1 لتر:

20 جرام من مستخلص الشعير (يمكن شراء مواد صنع البيرة الشائعة عبر الإنترنت)

15 جرام أجار (عامل ترسيخ - يستخدم للطهي في كثير من الأحيان بحيث يمكن شراؤه عبر الإنترنت أو في بعض متاجر البقالة)

1 لتر H20 (عادةً ما أستخدم مياه التناضح العكسي التي يمكن شراؤها من معظم محلات البقالة في أباريق غالون)

يمكن تعديل هذه الوصفة بسهولة إذا كنت تريد عمل كميات أقل. غالبًا ما أصنع 250 مل فقط في المرة الواحدة على سبيل المثال ، لذلك انتهى بي الأمر باستخدام 5 جرامات من خلاصة الشعير و 3.75 جرام من Agar و 250 مل من الماء.

الخطوة 3: تلقيح طبق بتري بالفطريات

الفطر الذي تراه يسمى "الجسم الثمرى" وهو جزء صغير من الكائن الحي. يتم إخفاء معظم جسده في الشجرة (أو في الأرض) ، مما يؤدي إلى التهام الخشب. يسمى هذا الجزء من الفطر بالميسيليوم. لاستنبات الجسم الخيطي الأبيض ، اللامع ، الجذمور ، الفطري في طبق بتري ، ستأخذ عينة من الساق وتعقمها وتضعها على أطباق MEA الخاصة بك. سوف تنمو الفطريات من عينة قلب جذع الفطر المعقم وتستعمر طبق بتري ، وتبدو مثل حصيرة قطنية بيضاء.

انك سوف تحتاج:

• أطباق Malt Extract Agar (MEA) التي أعددتها في الخطوة السابقة
• 70٪ كحول أيزوبروبيل (كحول محمر) وزجاجة رذاذ
• مناديل ورقية
• المبضع ، أو مجرد قاطعة الحلاقة المصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ ستعمل
• ملاقط معدنية
• قفازات
• شعلة - أستخدم مصباح كحول لتعقيم الأدوات ، يحتوي NonDisjunction على برنامج تعليمي رائع حول كيفية صنع واحد هنا.
• سطح معقم للتقطيع (لقد استخدمت للتو طبق بتري معقم لهذا الغرض)
• بارافيلم ، فيلم بارافين يستخدم لإغلاق أطباق بتري - يمكنك أيضًا استخدام شريط لاصق إذا لم يكن لديك هذا

تقنية معقمة:

الشيء الرئيسي الذي تريد أن تضعه في اعتبارك عند محاولة استخدام تقنية معقمة هو أن البكتيريا والجراثيم تتساقط باستمرار في الهواء ، لذا فأنت تريد إبقاء أطباق بتري مغطاة قدر الإمكان. عندما ترفع الأغطية لصب الوسائط ، أو للتلقيح ، فمن الأفضل دائمًا إبقاء الغطاء فوق الطبق مباشرةً ، مما يسمح لك بالوصول إلى الداخل أفقيًا ، مع إبقاء الغطاء فوق الطبق لمنع البكتيريا من السقوط فيه. ثانيًا ، أنت هي تكتل عملاق من الكائنات البشرية والبكتيرية والفطرية وغيرها من الكائنات الحية … على الرغم من أنك لا تستطيع رؤيتها ، فأنت محاط بسحابة كثيفة من الميكروبات التي تنتشر من جسمك. بدلاً من مجرد الجلوس على سطح بشرتك ، فإن منطقتك الحيوية الدقيقة تمتد إلى الهواء ~~ sooooooo ، لا تلوح بيديك على طبق بتري أبدًا ، أو تميل على الطبق المفتوح للنظر فيه. وارتدِ القفازات إذا حصلت عليهم ؛)

قم بإعداد مساحة العمل شبه المعقمة الخاصة بك

اختر سطح عمل غير مسامي وخالي من الحطام والخردة. رش المنطقة بمحلول كحول الأيزوبروبيل 70٪ وامسحها بمنشفة ورقية. ضع لهبك في وسط منطقة عملك وأشعله. سترغب في العمل بالقرب من اللهب قدر الإمكان لأنه يخلق حقلاً صغيرًا معقمًا حوله. ضع أطباق MEA على جانب واحد وعينة الفطر على سطح تقطيع معقم على الجانب الآخر. عادةً ما أستخدم طبق بتري معقم كسطح قطع معقم وكذلك كمسند للأداة. صب بعض كحول الأيزوبروبيل في كوب صغير - ستستخدمه لتعقيم الشفرة والملاقط أثناء العمل.

* ¡~ تلقيح ~! *

قبل القيام بأي شيء ، قم بتعقيم الشفرة والملاقط عن طريق غمسها في الأيزوبروبيل ثم وضعها فوق اللهب قليلًا. بعد التعقيم ، ضعيها على سطح القطع المعقم إذا قمت بتثبيتها. باستخدام الملقط ، ثبت ساق الفطر واقطع جزءًا من نهايته. خذ هذه القطعة واقطع كل الجوانب حتى ينتهي بك الأمر بمكعب صغير من لب جذع الفطر مع إزالة جميع الأسطح الخارجية. يساعد ذلك في التخلص من جميع الميكروبات الأخرى التي تعيش على الفطر حتى لا تلوث ثقافتك. ثم اغمس لب الجذع في الأيزوبروبيل لمدة 30 ثانية تقريبًا ، ثم اسحبها واتركها تجف داخل الحقل المعقم للهب (لا تستخدم اللهب لتجفيفه ، فهذا سيقتل عيش الغراب). يعقم اللهب الملقاط مرة أخرى بينما تنتظر حتى يجف لب الجذع. ثم قم ببساطة برفع غطاء إحدى لوحات MEA الخاصة بك بما يكفي لإدخال الملقط من الجانب ، واستخدم الملاقط المعقمة لوضع قلب الجذع في وسط اللوحة. قم بإغلاق اللوحة باستخدام parafilm ، وخلال الأسابيع القليلة القادمة ، يجب أن ترى S. Commune mycelium يستعمر اللوحة.

عادةً ما أقوم بصنع العديد من اللوحات عند العمل مع العينات البرية حتى إذا تعرضت للتلوث ، فمن المرجح أن يكون لدي ثقافة واحدة نظيفة على الأقل.